Layton Kyouju to Eien no Utahime

Layton e seu aprendiz recebem um pedido da cantora de ópera Jenis Quatlane para comparecerem ao seu espetáculo e ajudarem com um mistério. Sua amiga Melina morreu um ano antes, mas reapareceu como uma menina de sete anos, alegando ter descoberto o segredo da vida eterna e possuindo conhecimentos que somente a verdadeira Melina teria. Intrigados, Layton e Luke viajam para o teatro Crown Petone, enquanto Rémi fica em Londres para investigar casos de meninas desaparecidas. A ópera conta a história de uma rainha do Reino dos Imortais que adoeciu e morreu, após o que uma poção para a imortalidade foi criada. O povo do reino, desejando se reunir com sua rainha, bebeu a poção para se tornar imortal. A história termina com um homem mascarado desafiando o público a um jogo, oferecendo vida eterna ao vencedor e morte aos demais. Layton e Luke devem participar para descobrir a verdade por trás da vida eterna. Os eventos ocorrem entre os jogos *Professor Layton and the Last Specter* e *Professor Layton and the Miracle Mask*.