Layton Kyouju to Eien no Utahime

Layton na mwanafunzi wake wanapokea ombi kutoka kwa mwimbaji wa opera Jenis Quatlane wa kuhudhuria onyesho lake na kusaidia kufumbua kitendawili. Rafiki yake Melina alifariki mwaka mmoja uliopita lakini ametokea tena akiwa msichana mwenye umri wa miaka saba, akidai amegundua siri ya uhai wa milele na akiwa na maarifa ambayo Melina halisi pekee angeyajua. Akiwa amevutiwa, Layton na Luke wanasafiri kwenda jumba la opera la Crown Petone huku Remi akibaki London kuchunguza wasichana waliopotea. Opera hiyo inasimulia hadithi ya malkia katika Ufalme wa Wasiokufa aliyepatwa na ugonjwa na kufa, baada ya hapo kichuzio cha uhai wa milele kilitengenezwa. Watu wa ufalme huo, wakitamani kuungana tena na malkia wao, walikunywa kichuzio hicho ili kuwa wasiokufa. Hadithi inaishia kwa mtu aliyevaa kinyago akiwapa changamoto watazamaji ya mchezo, akimtoa uhai wa milele mshindi na kifo kwa wengine. Layton na Luke wanapaswa kushiriki ili kufichua ukweli nyuma ya uhai wa milele. Matukio yanatokea kati ya michezo Professor Layton and the Last Specter na Professor Layton and the Miracle Mask.