Layton Kyouju to Eien no Utahime

Лейтн та його учень отримують запит від оперної співачки Женіс Кватлан, щоб відвідати її виступ і допомогти з загадкою. Її подруга Меліна померла рік тому, але з'явилася знову як дівчинка сім років, стверджуючи, що вона відкрила секрет вічного життя і має знання, які мала тільки справжня Меліна. Захоплені цим, Лейтн і Люк вирушають до оперної трупи Crown Petone, тим часом як Ремі залишається в Лондоні, щоб дослідити зникнення дівчат. Опера розповідає історію королеви в Королівстві Неземних, яка захворіла і померла, після чого було створено зілля бессмерття. Жителі королівства, прагнучи знову зустрітися з королевою, випили зілля, щоб стати бессмертними. Історія закінчується тим, що закритий чоловік викликає глядачів на гру, обіцяючи вічне життя переможцеві і смерть іншим. Лейтн і Люк повинні взяти участь, щоб відкрити правду про вічне життя. Події відбуваються між іграми *Professor Layton and the Last Specter* і *Professor Layton and the Miracle Mask*.